В каком диапазоне молекулярных масс находятся растительные пептиды?

За пределами биофармацевтики | Часто задаваемые вопросы о растительных белковых пептидах

Краткий ответ:Большинство коммерческих растительных белковых пептидов поставляются с распределением молекулярной массы, центрированным в диапазоне 1000–3000 дальтон, со значительной долей ниже 1000 Да и небольшим хвостом выше 5000 Да. Показатель в сертификате анализа описывает распределение, а не отдельное значение, и зависит от метода: результат сопоставим только с другим результатом, полученным с помощью той же методики, набора колонок и калибровочных стандартов.

Почему распределение важнее среднего значения

В результате гидролиза образуется смесь: свободные аминокислоты, дипептиды и трипептиды, короткие и средние цепи, а также остаточная фракция более крупных фрагментов. Каждая часть этой смеси ведет себя по-разному в составе. Очень мелкая фракция растворяется мгновенно, но влияет на вкус и осмоляльность; фракция с молекулярной массой 1000-3000 Да обычно сочетает хорошую растворимость с приятным вкусом, а более крупный хвост может увеличивать вязкость, вызывать помутнение или образование осадка после термической обработки. Два продукта с одинаковой средней молекулярной массой могут вести себя совершенно по-разному, если разброс вокруг этого среднего значения различен, поэтому в спецификациях указываются фракции, а не одно среднее значение.

Типичное распределение по коммерческим сортам

Фактическое содержание различных компонентов различается в зависимости от источника и сорта одного и того же сырья, поэтому распределение следует определять по сертификату анализа соответствующей партии, а не на основе типичного профиля.

Как измеряется распределение

Распределение молекулярной массы обычно определяется методом гель-проникающей хроматографии (ГПХ), также называемой эксклюзионной хроматографией (ЭХ). Образец разделяется по размеру на колонке, а профиль элюции преобразуется в распределение с использованием калибровочной кривой, построенной на основе стандартов с известной молекулярной массой. Выбор колонки, подвижной фазы, калибровочных стандартов и детектора — все это влияет на кажущиеся значения, поэтому распределение, полученное в одной системе, нельзя просто вычесть из распределения, полученного в другой. Именно поэтому в спецификации следует указывать метод, а не только результат.

Распределение молекулярной массы и индекс растворимости ТСА — это не одно и то же.

Более простой и старый подход показывает долю азота, остающегося растворимым в трихлоруксусной кислоте, которая используется в качестве индикатора степени расщепления белка. Он быстр и полезен для контроля на этапе производства, но не является распределением молекулярной массы и не может быть преобразован в него. Продукт, описываемый как содержащий 80% растворимого в ТХУ азота, не означает, что 80% его материала имеет молекулярную массу ниже определенного значения. Если два поставщика указывают разные значения, перед сравнением следует запросить используемый метод.

Зависимость от степени гидролиза

Степень гидролиза измеряет количество разорванных пептидных связей, а распределение молекулярной массы — длину образовавшихся цепей. Обычно они взаимосвязаны — чем больше гидролиз, тем, как правило, меньше фрагменты, — но не взаимозаменяемы. Специфичность фермента и любой этап фракционирования могут привести к образованию двух продуктов с одинаковой степенью гидролиза, но разным распределением. Для получения прозрачного напитка необходимо указать оба параметра.

Что следует указать в технической спецификации

• Указаны диапазоны распределения и процентное содержание в каждом диапазоне, например, ниже 1000 Да, 1000-3000 Да и выше 3000 Да.
• Метод анализа, включая стандарты, используемые для калибровки.
• Степень гидролиза и основы ее измерения, представленные вместе с распределением.
• Содержание белка определяется с помощью коэффициента пересчета азота, поскольку он показывает, какая часть порошка фактически состоит из связанных с пептидами веществ.
• Проверка растворимости и прозрачности проводится с учетом ваших потребностей, уровня pH и технологических условий, а не только в воде.

Рекомендуемая литература

ВидетьЧто означает степень гидролиза?,Какие характеристики важны для анализа пептидов растений?икак производятся растительные пептиды.