Что такое тестирование на эндотоксины и когда требуется пирогенный контроль?

За пределами биофармацевтики | Часто задаваемые вопросы о фармацевтическом желатине

Краткий ответ:Тестирование на эндотоксины измеряет бактериальный эндотоксин, тип пирогена, который может вызывать лихорадку при попадании в кровоток, обычно с помощью теста с лизатом амебоцитов Limulus (LAL) или аналогичного современного метода. Контроль пирогенов требуется только в определенных случаях, главным образом, когда желатин или материал, полученный из желатина, предназначен для инъекционных препаратов, вакцин, биопрепаратов или других стерильных применений; желатин для обычных капсул и таблеток для приема внутрь обычно не контролируется на наличие эндотоксинов, и применимое требование всегда определяется готовым продуктом и действующей нормативной базой.

Пирогены и эндотоксины: основное различие

Пирогеном считается любое вещество, способное вызвать повышение температуры при попадании в кровь. Бактериальный эндотоксин, компонент внешней мембраны грамотрицательных бактерий, является наиболее распространенным и изученным пирогеном, и именно на него обычно обращают внимание при фармацевтическом тестировании. Эндотоксины термостойки, поэтому они могут выдерживать процессы, убивающие сами бактерии, именно поэтому материалы, предназначенные для стерильного или парентерального применения, должны быть протестированы, а не считаться чистыми.

Почему это требование зависит от способа управления

Человеческий организм по-разному переносит эндотоксин в зависимости от пути его попадания в организм. Пищеварительный тракт регулярно подвергается воздействию эндотоксина и обычно справляется с ним, поэтому для пероральных лекарственных форм, таких как капсулы и таблетки, контроль пирогенности или содержания эндотоксина, как правило, не требуется. Эндотоксин становится критически важным показателем качества только тогда, когда вещество или его экстракт могут попасть в кровоток, ткани или другие обычно стерильные места, как в инъекционных препаратах, парентеральных препаратах, вакцинах или биологических стабилизирующих средствах, а также в некоторых средствах для ухода за ранами или контактирующих с тканями областях применения.

Когда контроль пирогенов или эндотоксинов применяется к желатину

• Инъекционные или парентеральные лекарственные формы- Если желатин присутствует в инъекционном препарате, то вспомогательное вещество, как правило, должно соответствовать требованиям по содержанию эндотоксинов, установленным для данного продукта.
• Вакцины и биопрепараты- Использование желатина в качестве стабилизатора в инъекционных препаратах контролируется в соответствии со спецификацией готового продукта.
• Стерильные и медицинские применения- В некоторых случаях, связанных с контактом с тканями, имплантацией или использованием медицинских устройств, может потребоваться применение материалов с низким содержанием эндотоксинов.
• Специализированные сорта, не образующие геля- Гидролизованный или нежелирующий желатин для культивирования клеток или аналогичных целей иногда поставляется в вариантах с низким содержанием эндотоксинов, опять же, только если этого требует конкретное применение.

Обычный фармацевтический желатин для капсульных оболочек, таблеток и других твердых лекарственных форм для приема внутрь, как правило, не подлежит ограничениям по содержанию эндотоксинов, поскольку готовая продукция не имеет таких требований.

обычно используемые методы тестирования

Когда требуется тест на эндотоксин, выбор метода осуществляется в соответствии с действующей фармакопеей и инструкцией к препарату. Наиболее известным методом является тест с использованием лизата амебоцитов Limulus (LAL), который использует лизат клеток крови мечехвоста и реагирует на эндотоксин измеримым свертывающим или цветовым ответом. Более новыми вариантами являются анализы с рекомбинантным фактором С и тест на активацию моноцитов (MAT), а тест на пирогенность у кроликов измеряет реакцию на повышение температуры непосредственно, а не только эндотоксин. Результаты обычно выражаются в единицах эндотоксина, например, на грамм или на миллиграмм материала, в соответствии с согласованной спецификацией.

На что обращать внимание в сертификате подлинности

Если для вашего продукта действительно необходим желатин с низким содержанием эндотоксинов, запросите у поставщика желатин, имеющий подтвержденное низкое содержание эндотоксинов, и убедитесь, что в сертификате анализа указаны результаты определения эндотоксинов с применением метода и предельно допустимой концентрации. Если ваш продукт представляет собой капсулу или таблетку для приема внутрь, не следует предполагать, что в сертификате пищевого или капсульного качества обязательно должна быть указана информация о содержании эндотоксинов; и наоборот, не следует предполагать, что желатин капсульного качества подойдет для инъекционного применения. В случае сомнений, прежде чем указывать конкретный сорт желатина, уточните требования у вашей регулирующей или контрольной группы.

Рекомендуемая литература

Для получения более полной картины см.Как читать спецификацию фармацевтического желатина (сертификат анализа)иКакие микробные ограничения применяются к фармацевтическому желатину?.